QuickZyme总胶原蛋白检测试剂盒基于通过酸水解胶原蛋白获得的羟脯氨酸残基的定量比色测定。通常对于这种水解分析需要去除HCl,这是一个耗时的步骤和/或需要特殊设备。
QuickZyme Total Collagen测定是唯1一种不需要这个费力步骤的基于羟脯氨酸的测定,从而在水解步骤后进行快速(<2小时)和简单(96孔板格式)的测定。
胶原蛋白是细胞外基质的主要成分之一。胶原蛋白生成的失调会导致诸如纤维化(胶原蛋白过多)或骨关节炎(胶原蛋白太少)等疾病。因此,胶原蛋白生成的测量在许多与疾病相关的研究中都很重要。
艾美捷总胶原蛋白检测试剂盒是基于对羟脯氨酸的检测。羟脯氨酸是一种非蛋白氨基酸,在哺乳动物中存在于弹性蛋白和胶原蛋白中。它的存在主要限于胶原蛋白的三螺旋,其中它的存在增加了三螺旋的稳定性。羟脯氨酸是通过脯氨酸羟化酶的作用从特定的脯氨酸残基翻译后形成的。组织水解物中的羟脯氨酸可用作胶原蛋白含量的直接量度。
通过在95°C下在6M HCl中完全水解组织样品来开始测量胶原蛋白。使用Prockop和Udenfriend (Anal. Biochem., 1960, 1: 228-239)描述的方法的改进对水解产物中的羟脯氨酸残基进行定量。该测定法测量样品中存在的羟脯氨酸的总量,它代表样品中存在的所有类型的胶原蛋白,而不区分胶原蛋白的类型以及前胶原蛋白、成熟胶原蛋白和胶原蛋白降解产物。
该测定很简单,产生的色原在570 nm处具有最大吸光度。该测定法的开发方式使其不需要酸水解后的干燥步骤,而酸水解通常需要特殊设备。
艾美捷总胶原蛋白检测试剂盒化学性质:
应用:组织、细胞提取物、组织匀浆
样品要求:50 - 500微升
船运:在环境温度下。收到后,将产品存放在以下推荐的温度下。
存储/到期:未开封的试剂盒:在室温(RT)下避光保存。请勿使用超过套件有效期的套件组件。
打开的试剂盒:重组试剂:打开的胶原蛋白标准品和检测缓冲液应避光储存在4°C。其他打开的试剂应在室温下避光储存,并稳定至少1个月。复溶的检测试剂(A+B)应在复溶当天使用。
校准范围:0 - 300微克/毫升
检测限:2.5微克/毫升