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导师急了!核酸提取有那么难吗?师兄 30 分钟就搞定了

时间:2023/2/20 19:48:17来源:本站原创作者:佚名点击:

我完全是按照 protocol 操作的,从研磨、抽提到离心,两个多小时没敢错过一个小细节,现在我的样品快要没了。

师弟,别慌。提取和纯化特殊样品的核酸要找对方法,我有个宝藏方法又快又稳定,只要 30 分钟就能帮你搞定,而且有 15 种针对不同样本的试剂盒,现在还可以免费试用,你快申请试试吧。我也把总结的核酸提取关键点分享给你,保证你这周组会有结果汇报。

大师兄

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大师兄笔记:核酸提取难点一一击破

01 实验问题:提取的核酸得率低

解决方法

● 样品量与试剂的配比要控制在一定范围,避免超过裂解能力;

● 破碎研磨的步骤处理细节很重要,一定要充分研磨,这是核酸提取的首要条件;

● 在洗脱的步骤,使用足量的洗脱液洗脱并充分混匀,避免有团块残存;

● 实验耗材要匹配,如不同的吸附柱或磁珠的核酸吸附能力不同,也会影响核酸的得率。

02 实验问题:提取核酸出现降解

解决方法

● 提取的样品量要符合试剂的配比,尽量控制样品量达到合适比例;

● 每个步骤都要注意充分的混合均匀,避免团块的残留影响实验结果;

● 在洗脱时,时间过长或者温度过高,核酸有可能会降解;

● 样本切记不可反复冻融,提取的样本要注意在合适的温度保存,长期保存尽量 -80 ℃。

03 实验问题:提取到的核酸纯度不够高,甚至抑制物残留影响下游实验

解决方法

● 样本量和裂解液等试剂的配比要尽量控制到合适的范围;

● 混合均匀以确保裂解充分和没有团块残留;

● 晾干的步骤要充分,否则可能会导致醇类等杂质的残留;

● 磁棒振荡幅度太小或混合时间太短,磁珠上有杂质残留会影响磁珠吸附核酸的能力。

为了解决科研人核酸提取困难,耗时长且核酸质量差的困境,广州湾区生物经过不断的摸索优化,推出了K12 全自动化核酸提取纯化仪,能够15~60 min 内可以从动植物组织、全血、病毒、细胞等样本中自动提取纯化核酸,所提取核酸满足后续分子生物学实验需求。可用于生物学研究、临床分子诊断、动植物疫病监测等领域。

以提取植物的核酸为例,需要先液氮研磨再经过加热前处理,整个过程复杂、不稳定且难以控制。湾区生物核酸提取试剂盒,可实现室温孵育 10 分钟,无需高温就可以提取到高质量的核酸提取,更可以配合自动化 30 分钟内完成。

Baypure 磁珠法植物 DNA 提取试剂盒

简便的前处理:独特的裂解液处理样本,能够将样本中多糖多酚、淀粉和核酸有效释放、分离。室温孵育 10 分钟,无需高温。

适用样本范围广:已经过多种复杂难提取样本验证,提取核酸完整度高,适用于 10~50 mg 各种植物以及真菌样本的 DNA 提取。

提取便捷稳定:磁珠法提取试剂盒,除了能适应能配合仪器完成自动化完成实验,最短 30 分钟内获得高质量 DNA,结果更稳定。

提取 DNA 质量好:利用独特分离作用的磁珠和独特的缓冲液系统纯化提取的 DNA 纯度很高,纯化的基因组 DNA 适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern 杂交、芯片检测、高通量测序等实验。

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