链霉素ELISA检测试剂盒-美正生物

检测项目：兽药残留

适用样本：乳品、蜂蜜

概述

#链霉素ELISA检测试剂盒采用间接竞争#ELISA#方法，在酶标板微孔上预包被链霉素抗原，样本中链霉素和此抗原竞争链霉素抗体（抗试剂），加入酶标二抗（酶标物）与链霉素抗体相结合，经TMB底物显色，样本吸光值与链霉素含量呈负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样本中链霉素的含量。

适用范围

可定性、定量检测乳品、蜂蜜样中链霉素的含量。

检测步骤

1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20~25°C）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封，保存于2～8°C。切勿冷冻。

3、洗涤液在使用前也需回温。

4、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

5、加标准品/样本：加入标准品或样本100μL到对应的微孔中，再加入链霉素酶标物50μL/孔，再加入链霉素抗试剂50μL/孔轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25°C避光环境中反应30min。

6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤液250μL/孔，充分洗涤4～5次，每次间隔10s，在吸水纸上拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。

7、显色：加入底物液A液50μL/孔，再加入底物液B液50μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25°C避光环境中反应15min。

8、测定：加入终止液50μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630nm检测，请在5min内读完数据），测定每孔OD值。(若无酶标仪，则不加终止液用目测法可进行判定)。

结果判定

请利用试剂盒专业分析软件进行计算，更便于大量样本的准确、快速分析（欢迎来电索取）。

注意事项

1、室温低于20°C或试剂及样本没有回到室温（20～25°C）会导致所有标准的OD值偏低。2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。3、每加一种试剂前需将其摇匀。4、反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。5、不要使用过了有效日期的试剂盒；也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂，掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。6、储存条件保存试剂盒于2～8°C，不要冷冻，将不用的酶标板微孔板放进锡箔袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。7、试剂变质的迹象发色试剂有任何颜色表明发色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。8、在加入底物液A液和底物液B液后，一般显色时间为15min即可。若颜色较浅，可延长反应时间到20min，但不得超过20min。反之，则减短反应时间。9、浓缩洗涤液如有结晶属正常现象，请加热溶解后使用。10、该试剂盒最佳反应温度为25°C，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。